6번
발문
세포내 A 단백질의 이동을 분석하기 위해 유전자 조작을 통해 A 단백질에 GFP를 달아 fusion 단백질을 만들었다. 위상차 현미경으로 관찰한 결과 A단백질의 신호가 관찰되지 않았다. 그러나 다른 실험을 통해 GFP가 포함된 A 단백질이 제대로 만들어진 것과 동일한 성능을 보인다는 것을 확인했다. 현미경으로 관찰하지 못한 이유로 타당한 것은? (3점)
선지
① 형광 물질인 GFP가 제대로 작동하지 않았다. ② 형광 현미경을 사용해야만 GFP를 관찰할 수 있다. ③ GFP 때문에 분자가 너무 커서 현미경으로 관찰이 불가능하다. ④ A 단백질을 염색(staining)해야 현미경으로 관찰 가능할 것이다. ⑤ GFP를 잡는 secondary antibody를 사용해야 정확한 이동을 확인할 수 있을 것이다.
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해설
정답: ②
핵심 차이: **위상차 현미경(phase contrast microscopy)**은 형광을 사용하지 않는다. GFP는 형광 단백질이므로 **형광 현미경(fluorescence microscopy)**으로만 관찰 가능하다.
- ①: 다른 실험에서 GFP fusion 단백질이 정상 기능을 보인다고 확인했으므로 GFP 자체 이상 없음 ✗
- ②: 위상차 현미경은 형광이 아닌 굴절률 차이를 이용 → GFP의 형광 신호를 검출 불가 → 형광 현미경 필요 ✓
- ③: GFP fusion은 분자 크기를 크게 하나 현미경 관찰 자체가 불가능해지는 수준이 아님 ✗
- ④: GFP를 가진 단백질은 별도 염색 없이 형광 현미경으로 관찰 가능 ✗
- ⑤: GFP는 secondary antibody 없이 직접 형광을 발함 ✗