8번
발문
막 단백질의 확산속도를 측정하기 위해 다음 아래 방법을 사용하였다. 이 방법에 대한 설명으로 옳지 않은 것은? (E, 1점)
선지
① 일반적으로 형광 물질을 달아 측정한다. ② Recovery가 빠르면 확산속도가 빠르다는 의미이다. ③ Recovery를 이용해 막 단백질의 확산 계수를 추정할 수 있다. ④ 좁은 영역의 표백으로 한 개의 막 단백질의 이동도 관찰 가능하다. ⑤ 아주 강한 빛을 주게 되면 형광이 사라지는 photobleaching을 이용한 방법이다.
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해설
정답: ④
이 실험 방법은 FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)이다.
FRAP은 강한 레이저로 특정 영역의 형광을 표백(bleach)한 후, 주변에서 형광을 가진 분자들이 그 영역으로 확산해 들어오면서 형광이 회복(recovery)되는 속도를 측정하는 방법이다.
- ①: 형광 물질(fluorophore)을 단백질에 붙여 측정 ✓
- ②: Recovery 속도 = 확산 속도 ✓
- ③: Recovery 곡선으로 확산계수(diffusion coefficient) 계산 ✓
- ④: FRAP은 population level의 확산 측정 방법으로, 좁은 영역을 표백해도 수많은 분자들의 평균적인 이동을 측정하는 것이지 개별 분자 1개의 이동을 추적하지 않는다. 단일 분자 추적은 SPT(Single Particle Tracking) 방법이 사용된다. ✗
- ⑤: Photobleaching = 강한 빛으로 형광 파괴 ✓